细胞生物学的意义范文

【摘要】目的探讨环氧合酶2(COX2)反义核酸对喉癌细胞恶性表型的抑制作用。方法采用脂质体介导方法，分别构建转染COX2反义真核表达载体和空载体的喉癌细胞系Hep2AS和Hep2P细胞。RTPCR及Westernblot分析转染细胞COX2mRNA及蛋白表达水平；MTT比色实验、Boyden侵袭小室法和裸鼠成瘤实验分别检测转染细胞的体外增殖速度、体外侵袭力和体内成瘤性。结果RTPCR结果显示，Hep2AS细胞COX2/磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA比值(0.65)明显低于Hep2(0.92)和Hep2P细胞(0.90)；Westernblot结果提示Hep2AS细胞COX2/βactin比值(0.29)明显低于Hep2细胞(0.46)和Hep2P细胞(0.44)；MTT比色实验显示Hep2AS细胞较Hep2P、Hep2细胞生长速度减慢，三者倍增时间分别为3.6d、2.9d和2.9d；体外侵袭实验结果表明，Hep2AS侵袭细胞数(18.20±5.97)显著低于Hep2细胞(45.40±8.12)及Hep2P细胞(44.10±6.47)(P

【关键词】喉癌；核酸；环氧合酶2

ABSTRACT:ObjectiveToexploretheeffectofantisensenucleicacidofcyclooxygenase2(COX2)inmalignantphenotypeoflaryngealcancercellsandthemechanismofCOX2incarcinogenesisoflaryngealcancer.MethodsUsingLipofectamineTM2000reagent，theCOX2highlyexpressedinhumanlaryngealcancercelllineHep2wastransfectedwithantisenseeukaryoticexpressionvectorpcDNA3.1/hCOX2(-)andcontrolplasmidpcDNA3.1(namedasHep2ASandHep2Pcells，respectively).SemiquantitativeRTPCRandWesternblotwereusedtotestifythemRNAandproteinlevelinthetransfectedcells.MTTassay，Boydenchamberandtumorimplantationexperimentwereusedtodetecttheproliferation，invasionandtumorigenesisofthetransfectedcellsinvitroandinvivo.ResultsRTPCRanalysisindicatedthattheratioofCOX2mRNAtoGAPDHmRNAinHep2AScells(0.65)wassignificantlylowerthanthatinHep2(0.92)andHep2Pcells(0.90)(P

KEYWORDS:laryngealneoplasm;nucleicacid;cyclooxygenase2

环氧合酶2(cyclooxygenase2，COX2)与人类肿瘤密切相关，文献报道喉癌组织有COX2的高表达[1]。流行病学研究及动物实验均表明非甾体类抗炎药(NSAID)对结肠、直肠癌具有防治作用[2]，并认为这种作用与抑制COX2有关。本研究通过反义核酸技术，抑制人喉癌细胞中COX2的异常表达，观察喉癌细胞生物学行为的改变，探讨COX2在喉癌发生及其恶性生物学行为中的作用。

1材料与方法

1.1材料人喉表皮样癌Hep2细胞系购自第四军医大学口腔医院生物学教研室。SPF级BALB/C小鼠，由第四军医大学实验动物中心提供并饲养。人COX2反义真核表达载体pcDNA3.1/hCOX2(-)由第四军医大学西京医院消化内科吴汉平构建[3]并惠赠。脂质体LipofectamineTM2000购自美国GibcoBRL公司，胎牛血清购自杭州四季青公司，Boyden侵袭小室购自美国BD公司，羊抗人COX2多克隆抗体购自美国SantaCruze公司。

1.2细胞培养Hep2细胞常规培养于含10mL/L灭活胎牛血清的RPMIl640培养液中，37℃、50mL/LCO2孵箱培养。

1.3COX2反义核酸转染接种Hep2细胞于6孔板培养至80%融合，转染前24h更换为无血清RPMI1640培养液。实验分3组：COX2反义核酸转染组，空载体pcDNA3.1对照组，未转染空白组。配制A液：250μL无血清RPMI1640培养液(3组分别加入3μgpcDNA3.1/hCOX2(-)质粒、pcDNA3.1质粒或不加任何质粒)，B液：250μL无血清RPMI1640培养液加入6μL脂质体LipofectamineTM2000。将3组A、B液混合，培养4h后，更换为含100mL/L胎牛血清的RPMI1640培养液，继续培养48h。各组细胞倍比稀释(1∶10，1∶50，1∶250)后接种至24孔细胞培养板，换用含G418筛选培养液继续培养2周后，随机挑取转染组及对照组细胞克隆，扩大培养2个月，分别命名为Hep2AS、Hep2P细胞，未转染空白组细胞仍称为Hep2细胞。

1.4RTPCRCOX2上、下游引物为：5′CCGAGGTGTATGTATGAGTG3′，5′AACTGATGCGTGAAGTGCTG3′；内参基因磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)上、下游引物为：5′GAAGGTGAAGGTCGGAGTC3′，5′GAAGATGGTGATGGGATTTC3′(由上海生物工程有限公司合成)。Trizol法提取稳定转染的Hep2AS、Hep2P和Hep2细胞总RNA，按试剂盒说明将2μg总RNA逆转录为cDNA，将cDNA产物进行PCR扩增，GAPDH终产物486bp，COX2终产物232bp。PCR产物行10g/L琼脂糖凝胶电泳。

1.5Westernblot收集对数生长期Hep2、Hep2AS、Hep2P细胞并进行裂解，依次行SDSPAGE，转印NC膜，80g/L脱脂奶粉TBS中37℃振摇1h，加入羊抗人COX2多克隆抗体(1∶1000)4℃摇床过夜，TBST洗涤后加入HRP兔抗羊IgG室温作用3h，增强化学发光法显色照相。

1.6MTT比色实验取对数生长期的Hep2、Hep2AS及Hep2P细胞，制备单细胞悬液，以每孔5×103个细胞接种于96孔培养板，每种细胞设6个复孔，并设空白对照。分别在接种后第1、3、5、7天进行MTT比色实验。

1.7体外细胞侵袭力测定采用Boyden侵袭小室法，按照文献[5]方法操作。37℃、50mL/LCO2条件下培养20h后，常规HE染色，200倍光镜下取5个视野，计数膜下方的细胞数。实验重复3次，取均数。

1.8裸鼠移植瘤实验随机分为3组，每组3只裸鼠，分别接种对数生长期的Hep2、Hep2AS及Hep2P细胞，细胞密度为4×107个/mL。抽取瘤细胞悬液接种于裸鼠背部皮下，每个部位注射0.2mL含活细胞数8×106。从接种之日起，观察裸鼠精神、饮食及体积变化情况。每7d测量肿瘤结节大小，计算肿瘤体积。28d后处死裸鼠，取瘤体测量肿瘤结节大小，计算肿瘤体积并固定，切片行HE染色，观察显微结构改变。

1.9统计学处理采用SPSS10.0统计分析软件，组间分析采用t检验，侵袭力测定分析采用单因素方差分析，移植瘤体积以±s表示，分析采用重复测量数据的方差分析，P

2结

果

2.1人喉癌细胞COX2mRNA表达反义核酸转染引起人喉癌细胞COX2mRNA表达下调。在对照GAPDHmRNA丰度基本相等的情况下，亲本Hep2细胞及空载体转染Hep2P细胞COX2mRNA丰度基本相同，分别为110.8、108.6，而反义核酸转染Hep2AS细胞COX2mRNA丰度明显降低，为83.8。Hep2AS细胞COX2/GAPDHmRNA比值(0.65)明显低于Hep2细胞(0.92)和Hep2P(0.90)(P

2.2人喉癌细胞COX2蛋白表达反义核酸转染引起人喉癌细胞COX2蛋白表达下调。在对照βactin蛋白丰度基本相等的情况下，Hep2细胞与空载体转染Hep2P细胞COX2蛋白丰度基本相同，分别为45.2、43.8，而反义核酸转染Hep2AS细胞COX2蛋白丰度明显降低，为29.1。Hep2AS细胞COX2/βactin比值(0.29)明显低于Hep2细胞(0.46)和Hep2P细胞(0.44)(P

2.3反义核酸转染后人喉癌细胞增殖速度变化Hep2AS、Hep2P、Hep2细胞的倍增时间分别为3.6、2.9、2.9d。提示Hep2AS细胞生长速度较Hep2P、Hep2细胞慢，差异有统计学意义(P0.05)。

2.4各组细胞侵袭力结果反义核酸转染导致人喉癌细胞体外侵袭力下降。Hep2、Hep2P、Hep2AS组侵袭细胞数分别为34.5±6.21、32.01±5.79、16.02±7.59。提示Hep2细胞未转染组及空载体转染组细胞侵袭力相似，而反义核酸转染组细胞侵袭力显著低于前两者，差异有统计学意义(P

2.5裸鼠荷瘤实验结果反义核酸转染导致人喉癌细胞体内成瘤性降低。Hep2和Hep2P细胞接种裸鼠后第5天可见肿瘤长出，Hep2AS细胞接种裸鼠后第7天可见肿瘤长出。第9天开始测量肿瘤体积，以后每7d测量1次(表1)。方差分析表明，转染反义核酸的细胞成瘤性显著低于未转染细胞及转染空载体对照细胞，差异有统计学意义(P

3讨

论

近年的研究发现，结肠癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、肺癌等多种人类肿瘤COX2的表达明显增高，抑制COX2表达有可能预防和逆转肿瘤发生，表明COX2在肿瘤的发生发展过程中起重要作用[45]。

COX是催化花生四烯酸转化为前列腺素的限速酶，有3种同工酶形式：COX1、COX2和COX3。COX1呈组成性表达，由看家基因编码，与正常细胞的前列腺素合成有关；COX2为诱导性表达，正常情况下多数细胞中不表达，仅在炎症状态受细胞因子和有丝分裂原刺激等情况下表达增强；COX3是新近发现的COX1剪切变异体，在人类大脑皮质及心脏有丰富表达[6]。

COX2抑制剂阿司匹林、舒林酸或尼美舒利可降低啮齿类动物化学致癌模型中膀胱癌的发生率，表明COX2可促进膀胱癌的发生[78]。OKAJIMA等[9]研究发现选择性COX2抑制剂可明显抑制表达COX2的裸鼠移植瘤生长。王佳蓉等[1]观察76例原发性喉癌中COX2表达情况，COX2阳性表达组血管生成明显多于阴性表达组，证实COX2可促进肿瘤区域的血管增殖，从而参与喉癌血管生成，促进肿瘤生长。本实验选择COX2高表达的喉癌细胞系Hep2作为研究对象，利用反义核酸技术，将COX2编码cDNA序列反方向插入真核表达载体并转入COX2高表达的喉癌细胞，使之在胞内稳定、持续转录COX2基因的互补RNA链以封闭靶基因，从而制备了目的基因表达持续下调的细胞模型。虽然反义核酸技术目前由于载体的安全性、靶向性等实际问题而距临床应用尚有较远的距离，但仍不失为一种研究特定基因功能有效的实验方法。利用脂质体介导的基因转染方法，初步获得了稳定表达COX2反义RNA的喉癌细胞，通过RTPCR及Westernblot方法证实其COX2mRNA及蛋白表达水平显著下降。MTT比色实验显示反义核酸转染细胞体外增殖速度明显低于亲本细胞Hep2。Boyden侵袭小室法比较反义核酸转染前后细胞体外侵袭力改变，结果发现反义核酸转染细胞体外侵袭力显著低于未转染细胞及转染空载体细胞，说明COX2基因表达可促进喉癌细胞侵袭转移，是肿瘤细胞侵袭转移能力的一个正调控因子，抑制COX2基因表达可抑制喉癌细胞侵袭转移。裸鼠成瘤实验亦表明反义核酸转染细胞体内成瘤性下降，进一步证实了COX2的促癌作用。以上结果均表明COX2高表达确实与肿瘤细胞增殖、致瘤、侵袭转移等恶性表型密切相关，是引起肿瘤细胞恶性表型的相关基因之一。目前许多抗肿瘤药物临床疗效不理想，原因之一可能是肿瘤细胞表达COX2增加，诱导抗凋亡基因Bcl2的表达。因此，开发特异性COX2抑制剂将为喉癌防治开辟新的方向。

参考文献

[1]王佳蓉，张白凌，张鹏飞.环氧合酶2与血管内皮生长因子在喉癌的表达及意义J].福建医科大学学报，2006，40(2):136138.

[2]MAIERTJ，SCHILLINGK，SCHMIDTR，etal.Cyclooxygenase2(COX2)dependentandindependentanticarcinogeniceffectsofCelecoxibinhumancoloncarcinomacells[J].BiochemPharmacol，2004，67(8):14691478.

[3]吴汉平，吴开春，李玲，等.人环氧合酶2(COX2)编码基因的克隆及其反义核酸转染胃癌细胞的初步研究[J].世界华人消化杂志，2000，8(11):12111217.

[4]OKAJIMAE，UEMURAH，OHNISHIS，etal.Expressionofcyclooxygenase2inprimarysuperficialbladdercancertissuemaypredictriskofitsrecurrenceaftercompletetransurethralresection[J].AktuelleUrol，2003，34(4):256258.

[5]WULFINGC，ELTZEE，VONSTRUENSEED，etal.Cyclooxygenase2expressioninbladdercancer:correlationwithpooroutcomeafterchemotherapy[J].EurUrol，2004，45(1):4652.

[6]CHANDRASEKHARANNV，DAIH，ROOSKL，etal.COX3，acyclooxygenase1variantinhibitedbyacetaminophenandotheranalgesic/antipyreticdrugs:cloning，structure，andexpression[J].ProcNatlAcadSciUSA，2002，99(21):1392613931.

[7]ROMSINGJ，MOINICHES.AsystematicreviewofCOX2inhibitorscomparedwithtraditionalNSAIDs，ordifferentCOX2inhibitorsforpostoperativepain[J].ActaAnaesthesiolScand，2004，48(5):525546.

细胞生物学的意义范文篇2

【摘要】目的：研究葡萄糖对l02细胞肝x受体(lxrα)与血管生成素样蛋白3(angptl3)基因表达的影响，探讨lxrα在糖尿病和脂代谢联系中的作用.方法：用5.6,7.0,11.1,28.0和33.0mmol/l的葡萄糖培养l02细胞，5.6mmol/l组作为对照组.用胆固醇酶联法测定各组细胞内胆固醇含量，采用rt?pcr方法检测lxrα和angptl3的mrna表达量.结果：高浓度葡萄糖可促进l02细胞内胆固醇含量上调lxrα和angptl3mrna表达，变化差异均有统计学意义(p<0.05).结论：高浓度葡萄糖增加angptl3表达，可能是通过增加细胞内总胆固醇含量而激活lxrα，而lxrα的激活则引起angptl3基因的高表达.

【关键词】血管生成素样蛋白3；肝x受体α；糖尿病

【abstract】aim:toinvestigatetheeffectsofglucoseonexpressionsoflxrαandangptl3inl02cell,andtoexploretherelationoflxrαwiththedevelopmentofdiabetesmellitusaccompaniedwithhyperlipoproteinemia.methods:l02cellswereculturedseparatelyinmediumscontaining5.6,7.0,11.1,28.0and33.0mmol/lglucose,amongwhich5.6mmol/lglucosegroupwastakenascontrol.quantitativeanalysisofintracellularcholesterolcontentwasperformedbycholesterolenzymelinkassays.thelxrαandangptl3mrnaweredeterminedbyreversetrancriptasepolymerasechainreaction(rt?pcr).results:theexpressionoflxrαandangptl3mrnaincreasedwiththeincreaseoftheglucoseconcentration.thelevelshadsignificantdifference(p<0.05).thecontentsoftotalcholesterolalsoincreasedsignificantlyinl02cell,andhadsigni?ficantdifference(p<0.05).conclusion:glucosemayinterfereangptl3mrnathroughincresasingtotalcholesterol,activatinglxrα.theactivationoflxrαupregulatestheexpressionofangptl3.

【keywords】angiopoietin?likeprotein3;lxrα;diabetesmellitus

0引言

肝x受体（liverx?activatedreceptor,lxrs）是核受体超家族的成员，包括两种同源亚型lxrα(nr1h3)和lxrβ（nr1h2）.lxrs作为甾醇类感受器调节一系列与脂质代谢相关基因的表达.血管生成素样蛋白3（angiopoietin?likeprotein3,angptl3）是新的lxrs靶基因，在脂质代谢中有重要作用［1-2］.本研究以人肝细胞株l02为研究对象，从细胞水平研究葡萄糖对lxrα和angptl3基因表达的影响，探讨lxrα在糖尿病和脂代谢联系中的作用.

1材料和方法

1.1材料人肝细胞株l02（重庆医科大学基础医学研究所）；rpmi1640普通培养基（美国gibco公司）；新生牛血清（杭州四季青公司）；rt试剂盒（日本toyobo公司）；pcr试剂盒（广州东盛生物公司）；lxrα,angptl3和β?actin引物（上海生物工程公司合成）；胆固醇酶联试剂（浙江伊利康公司）；pcr仪,geldoc100凝胶成像仪（美国bio?rad公司）.

1.2方法

1.2.1细胞分组及培养l02细胞以每孔3×105个细胞接种于培养板.在含100ml/l新生牛血清的rpmi1640培养液中培养36h后，随机分为5组（g1～g5），分别在不同浓度葡萄糖的培养液中培养24h.g1组为对照组.

1.2.2胆固醇含量测定5组l02细胞用rpmi1640培养基培养24h后，用pbs洗细胞2次，加细胞裂解液裂解细胞，30min后再超声裂解4次，4℃12000g离心15min.用lowry法测定细胞裂解液的蛋白质含量.胆固醇酶联法测定细胞裂解液的胆固醇含量.胆固醇含量参数以细胞裂解液胆固醇含量除以细胞裂解液蛋白质含量表示(mg/g).

1.2.3两种基因mrna表达的检测按试剂说明，常规方法提取细胞总rna，检测总rna的纯度和完整性.用rt?pcr方法检测各基因的mrna表达量.lxrα上游引物：tcccacggatgctaatg，下游引物：tcccaggaatgtttgcc.angptl3上游引物：tccagaacacccagaagtaac，下游引物：ccagcctcctgaataaccct.β?actin上游引物：tcctccctggagaagagcta，下游引物：tcaggaggagcaatgatcttg..pcr反应条件为：94℃预变性4min后进行94℃30s，55℃30s，72℃1min，共35个循环，72℃延伸10min.取各基因扩增产物6μl用于25g/l琼脂糖电泳，溴化乙啶染色后采集图像,用angptll3，lxrα与β?actin面积灰度值的比值表示各基因mrna的表达量.

统计学处理：用spss13.0软件包进行统计分析.数据以x±s表示，多组均数的比较采用单因素方差分析，两两之间比较用lsd?t检验，p<0.05为差异有统计学意义.

2结果

2.1葡萄糖对细胞内胆固醇含量的影响随着环境葡萄糖浓度增加，细胞内胆固醇含量也不断增加，g1～g5五组间总胆固醇含量相比较，差异具有统计学意义(p<0.05).g2～g5组分别与g1组相比，g2组的总胆固醇升高，但差异无统计学意义(p>0.05)，而g3～g5组差异均有统计学意义(p<0.05).g3组，g4组和g5组三组间两两比较，差异均无统计学意义(p>0.05，表1).

表1葡萄糖对l02细胞angptl3与lxrα表达和胆固醇含量的影响（略）

ap<0.05vsg1.

2.2葡萄糖对lxrα和angptl3mrna表达的影响随着葡萄糖浓度增加，lxrα和angptl3的mrna表达量均增加，g1～g5各组间相比较差异具有统计学意义(p<0.05).g2组与g1组比较，lxrα和angptl3的mrna表达量升高，但差异无统计学意义(p>0.05)，g3～g5组分别与g1组比较，lxrα和angptl3的mrna表达量差异均有统计学意义(p<0.05).g3组，g4组和g5组三组间两两比较，差异均有统计学意义(p<0.05，图1，2).

m：marker；1～5：依次为葡萄糖5.6，7.0，11.1，28.0，33.0mmol/l组.

图1葡萄糖对l02细胞lxrαmrna表达的影响（略）

m：marker；1～5：依次为葡萄糖5.6，7.0，11.1，28.0，33.0mmol/l组.

图2葡萄糖对l02细胞angptl3mrna表达的影响（略）

2.3葡萄糖对angptl3蛋白质表达的影响在蛋白质表达水平，g2～g5组分别与g1组比较，差异均有统计学意义(p<0.05).此外，g2～g5组间两两比较，除了g4组与g5组差异无统计学意义(p>0.05)，其它各组间差异均有统计学意义(p<0.05，图3).

1～5：依次为葡萄糖5.6，7.0，11.1，28.0，33.0mmol/l组.

图3葡萄糖对l02细胞angptl3蛋白质表达的影响（略）

3讨论

lxr是配体激活的转录因子［3］，其最有效的内源性激动剂是胆固醇的衍生物.大量研究表明lxrs可调节一系列与脂质代谢相关基因的表达，而维持脂质代谢的平衡［4］.angptl3是典型的lxr靶基因，在其启动子区域有lxr反应元件［5］，angptl3主要通过抑制脂蛋白脂肪酶(lipoproteinlipase,lpl)的活性导致以及低密度脂蛋白(verylow?densitylipoprotein,vldl)三酰甘油升高为主的高脂血症.已有研究表明，高浓度葡萄糖能上调细胞内angptl3的mrna和蛋白质表达，且在一定范围内呈正相关［6］.本实验发现高浓度葡萄糖能增加l02细胞内胆固醇含量，但当葡萄糖浓度高于11.0mmol/l后，葡萄糖对细胞内胆固醇的合成影响不明显，同时高浓度葡萄糖还上调了lxrα和angptl3的表达.kaplan等［7］研究发现高胆固醇饮食的小鼠肝脏angptl3表达明显增加，lxr激动剂t090137也会提高angptl3mrna的水平.这与本实验结果是相符合的.结合本实验结果和文献报道，我们可以推测高糖可能通过增加细胞内胆固醇含量而激活lxrα，lxrα的激活能引起angptl3的mrna和蛋白质高表达，angptl3高表达可导致脂类代谢紊乱.因此，良好地控制血糖浓度，能够有效地维持糖和脂类的代谢平衡，lxrα和angptl3可能成为联系糖和脂类的代谢的重要分子.

【参考文献】

［1］shimamuram,matsudam,kobayashis,etal.angiopoietin?likeprotein3,ahepaticsecretoryfactor,activateslipolysisinadipocytes［j］.biochembiophyrescommum,2003,301(2):604-609.

［2］koishir，andoy，onom，etal.angptl3regulateslipidmetabolisminmice［j］.natgenet,2002,30(2):151-157.

［3］lehmannjm，kliewersa，moorelb，etal.activationofthenuclearreceptorlxrbyoxysterolsdefinesanewhormoneresponsepathway［j］.jbiochem,1997,272(6):3137-3140.

［4］吴静，张志文，管又飞.lxrs在脂质代谢中的作用［j］.生理科学进展,2004,35(1):69-72.

［5］inabat,matsudam,shimamuram,etal.angiopoietin?likeprotein3mediateshypertriglyceridemiainducedbyliverxreceptor［j］.jbiolchem,2003,278(24):21344-21351.

细胞生物学的意义范文

关键词：思维导图；高中生物；教学分析；实践运用

中图分类号：G633.91文献标识码：B文章编号：1672-1578（2017）05-0178-01

前言：高中生物教学涉及很多生物信息数据和课堂实验操作，不仅强调了课本上的理论知识，更加注重培养学生在实验室的动手能力。必须把实践课程与理论课程更好的相结合，才能让高中生进行良好的素质教育。老师以树枝的延展效果图的形式展把知识点串联起来，不仅加了深学生对内容的印象、提高学生的学习效率，并且把知识有规律的进行梳理整合，不仅培养了学生的自主学习能力、并且激发了学生的探索研究的学习兴趣，让学生能够发自内心的爱上生物、爱上学习、爱上学校。

1.思维导图的特点和优势

1.1思维导图这种学习方式，可以通过以图文并茂的延展效果图的形式把知识点串联在一起，并且更加具体、有想象力、有层次、有规律地展现出来。让学生能够更加轻松、更加灵活、更加容易地接受、记忆和消化知识点。

1.2充分发掘人类大脑的潜能。通过不断的联想和拓展知识点自发性的去丰富课程内容，能够有效提高人类大脑的记忆力和接受教育的学习能力。能够充分培养学生的延展性思维和创造性思维。

1.3减少了教师教学课程难度。教师可以将思维导图法与高中生物学进行有效地整合，清晰的梳理出系统性的生物教学知识点，有利于学生通过知识的分布网从而找到知识点和知识点之间的联系。让教师能够更加轻松、更加灵活、更加高效率的完成教学任务。

2.思维导图在教学中的应用建议

2.1必须遵循以教材为基础的理念完成思维导图教学：思维导图法只是一种教学当中的一种辅助教学的手段，课堂教学内容的设置最终要以学校教材为基础，合理地、巧妙地、灵活地运用思维导图法教学，培养学生的延展性思维模式和提高学生的自主学习能力，更好地促进学生对高中生物学习内容的掌握。

2.2必须结合学生实际特点和需要完成思维导图教学：在现代教育理念下，学生是课堂学习的主体，教师是作为学生学习的辅助者和引导者而存在。老师必须充分利用高中学生们在现有的这个年龄段所具有的特征和特点，并且结合实际的课程任务，来完成思维导图教学。

2.3恰当选择教学内容促进学生创新性思维发展：在实际教学过程中当中，有些教学内容具有一定的开放性、有些内容是固定的、不可转变的。比如说：生物公式的固定的，成分分子是固定的，化学配料比例是固定的。这就要求教师在教学过程中要学会分辨知识的性质和类型，灵活的运用思维导图法。

3.思维导图法教学的实际案例分析：

本篇文章结合作者自身对思维导图法的理解、结合高中生物课程中当中的"细胞的生命历程"这一知识点进行一次系统性的联想和梳理。

3.1细胞的生命历程分为5个阶段：（1）细胞的增殖。（2）转变成为细胞的分化。（3）细胞的分化转变为细胞的衰老。（4）细胞的衰老导致细胞的凋亡。（5）细胞分化也会导致细胞的癌变。

由以上5个大的知识点又细化成一些列小的知识分支。

3.2细胞的增殖。（1）细胞周期。需要记住的知识点：概念、分期、分裂期。（2）分裂方式。需要记住的知识点：有效分裂（概念、过程、意义）、减数分裂、无效分裂（过程、特点、实例）。（3）细胞增殖的意义。

3.3细胞的分化。（1）概念、特点、结果、实质、意义。（2）细胞的全能型：植物细胞、动物细胞、应用。（3）干细胞（概念、类型、特点、医学应用）。

3.4细胞的衰老。（1）过程。（2）特征。（3）原因。（4）与人体健康的关系。

3.5细胞的凋亡。（1）概念。（2）实例。（3）意义。（4）与人体健康的关系。

3.6细胞的癌变（由细胞的分化转变为细胞的癌变）。（1）癌细胞（概念、特征）。（2）癌变的机理。（3）致癌因子（物理、化W、病毒致癌因子）。（4）健康的生活方式与防癌。

结语：综上所述：思维导图法是一种教学意义上的新突破，也是历史潮流中发展的新突破。在高中生物教学实际运用上来说起到了不容小觑的作用，这就要求教师在高中生物教学中必须灵活的运用思维导图法来进行教学。一方面必须要遵循以教材为基础的理念完成思维导图教学；另一方面要结合学生实际特点和需要来完成思维导图教学；更加需要结合恰当的教学内容来对学生进行正确的教学引导。让学生能够发自内心的爱上生物、爱上学习、爱上学校。

参考文献：

[1]康虹丽.概念图和思维导图在高中生物教学中的应用前景[J].内蒙古教育：b，2015（2）：48-49.