载玻片纱布擦干，涂菌部位火焰除油。
把菌液涂抹在载玻片上，接种环要在火焰中灭菌。
让涂片自然干燥。
菌膜朝上，用火焰固定2-3次。
把固定过的图片放报纸上，加草酸铵结晶液，染色1分钟。
用水缓慢冲洗载玻片上的染色液，吸水纸吸干。
加一滴碘液，染色1分钟，水洗。
吸残留水，加95%乙醇脱色半分钟，流出液体无紫色后，立即水洗。
加蕃红染色四分钟，水洗。革兰氏染色完成，观察即可。
革兰氏阳性菌为蓝紫色，阴性菌为红色。